搜索结果: 1-15 共查到“家畜微生物学 PCR”相关记录17条 . 查询时间(0.078 秒)
Evaluation of the effects of tropical tanniferous plants on rumen microbiota using qRT PCR and DGGE analysis
Sheep condensed tannin gas production methanogenic Fibrobacter succinogenes electrophoresis molecular techniques
2015/6/24
Tanniferous forages may have bacteriostatic and/or bactericidal effect on different rumen microbial populations. We investigated the influence of the tropical tanniferous plants Styzolobium aterrimum ...
Clostridium perfringens in suckling piglets with diarrhoea and its PCR typing and prevalence in the Czech Republic in 2001–2003
Clostridium perfringens multiplex PCR β2-toxin pig enteritis
2015/3/5
Out of the total of 153 farms under investigation that had been experiencing diarrhoea in suckling piglets, the presence of Clostridium perfringens was detected on 60 farms (39.2%). PCR typing of isol...
胞内劳森菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
猪胞内劳森菌 TaqMan荧光定量PCR 检测
2014/12/25
为建立猪胞内劳森菌的TaqMan荧光定量PCR检测方法，针对胞内劳森菌的16S rDNA基因设计合成特异性的引物和TaqMan探针，经过优化各项反应条件，建立了TaqMan荧光定量PCR检测方法。该方法仅对胞内劳森菌靶基因有信号，其相关性方程为Ct=－3.318×log(conc)+ 38.840（R2=0.998），具有良好的线性关系，对标准质粒最低检出量为5.55 copies•μ...
天山北坡绵羊面部湿疹高发草场病原真菌分离及PCR-DGGE分析
面部湿疹 真菌 PCR-DEEG
2014/12/25
旨在探讨天山北坡放牧绵羊面部湿疹发病区草场真菌的种类及多样性，查明疾病发生与放牧地理位置、真菌群落分布的相关性。调查发病地区的地理环境特征，采集发病季节绵羊面部湿疹发病区域和非发病区域牧草和土壤样本，进行真菌分离培养，形态学观察，真菌种类及分布统计分析；提取真菌总DNA，利用18S rDNA的变性梯度凝胶电泳（DGGE）和测序技术，进行真菌多样性分析。结果显示发病地区地理位置为N44.016～44...
多重PCR方法快速鉴别肠炎、鼠伤寒、鸡白痢及鸡伤寒沙门菌
沙门菌 多重PCR 血清型 鉴定
2014/3/31
根据沙门菌属特异性基因hut及型特异性基因SdfⅠ、Spy、glgC和Spec序列，设计5对引物，建立沙门菌多重PCR方法，并用临床样品分离菌株对该方法进行检验。结果显示，该方法能特异性地鉴定肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌，4种细菌检测灵敏度均为3×103 CFU，染色体DNA检测灵敏度分别为162、202、214和178 pg·μL－1。55份临床分离株检测的结果显示，与传...
血管内皮生长因子（VEGF）实时荧光定量PCR质粒标准品的构建
实时荧光定量 VEGF基因 质粒标准品
2012/2/15
应用SYBR Green荧光染料检测方法构建VEGF基因质粒标准品，能快速、灵敏、可靠的检测与临床多种疾病密切相关的重要候选基因血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况。本研究利用版纳微型猪近交系4~6月龄猪，提取皮肤创面总RNA，设计特异引物，进行RT PCR扩增。纯化目的片段并与pMD18T载体连接，转化宿主菌DH5α，提取重组质粒DNA，并经酶切、PCR和测序鉴定，计算重组质粒原液拷贝数浓度并...
PCR法检测水中金黄色葡萄球菌肠毒素A基因
金黄色葡萄球菌 肠毒素A基因 PCR技术 水样
2009/6/22
［目的］建立一种快速准确检测水中金黄色葡萄球菌肠毒素A的方法。［方法］将金黄色葡萄球菌模拟污染的水增菌后提取菌体DNA，以沙门氏菌、大肠杆菌DNA和空白作对照，用PCR法扩增金黄色葡萄球菌肠毒素A基因。［结果］金黄色葡萄球菌DNA的检测结果呈阳性，检测底限达100 cfu/L，而大肠杆菌和沙门氏菌及空白对照均未出现特异性片段，整个检测过程只需要24 h。［结论］试验建立的PCR方法可检测水及类似食...
PCR及核酸探针检测耐甲氧西林葡萄球菌mecA基因的研究
耐甲氧西林葡萄球菌 mecA基因 PCR 核酸探针
2009/1/6
为了解耐甲氧西林葡萄球菌在畜禽间的存在情况，本试验建立针对mecA基因的PCR方法及地高辛标记核酸探针技术，分别用两种方法对75株葡萄球菌分离株进行检测。结果，经PCR方法检出42株耐甲氧西林葡萄球菌，占分离株的56.0%；经核酸探针方法检出47株耐甲氧西林葡萄球菌，占分离株的62.7%，两种方法的总符合率为93.3%。通过本研究证实，在畜禽的体表及体内能够分离到耐甲氧西林葡萄球菌，且有较高的分离...
快速鉴别奶牛乳腺炎细菌或真菌的双重PCR方法
奶牛乳腺 细菌 真菌 双重PCR
2008/12/11
综合多种细菌、真菌DNA模板的提取方法，采用β巯基乙醇裂解细胞壁，利用蜗牛酶和溶菌酶消化细胞壁，再利用石英砂机械破壁，能彻底破坏细菌、真菌细胞壁，提取高质量的DNA，摸索出一套从奶样中同时提取细菌、真菌核酸的新方法。建立双重PCR方法,同时完成对细菌16S rRNA保守区特异性基因片段和真菌18S rRNA保守区特异性基因片段的扩增,快速诊断奶牛乳房炎是细菌感染还是真菌感染或是混合感染。对采自临...
采用PCR-DGGE技术分析蛋鸡肠道细菌种群结构及多样性
蛋鸡 肠道菌群 变性梯度凝胶电泳(DGGE) 多样性
2008/12/1
使用基于16S rDNA的PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)图谱技术结合特异性和共性条带割胶回收DNA进行克隆和测序，对2，4，6和8周龄蛋鸡嗉囊、十二指肠、空肠、回肠和盲肠内含物细菌群落的结构和多样性进行了比较，并鉴定了8周龄蛋鸡部分特异性和共性群落成员，分析蛋鸡年龄和肠段部位对微生物群落结构和多样性的影响。肠道菌群DGGE图谱显示肠道部位对细菌种群结构影响很大，盲肠内微生物的多样性最高，其次...
设计9个精料梯度的日粮饲喂干乳期成年荷斯坦奶牛，并对其瘤胃液中的部分细菌进行了分离，PCR-16S rDNA鉴定和动态检测。结果显示，以瘤胃液为原料，采用人工培养基共分离到56株细菌，并对7株具代表性的细菌进行了PCR扩增，经序列同源性比较，最终把细菌鉴定为牛链球菌(A0625、A1212、 0131)、蜡样芽孢杆菌（0113）、地衣芽孢杆菌（0091）、短小芽孢杆菌（0083）和嗜热链球菌(01...
根据猪链球菌谷氨酸脱氢酶基因和血清型1型、2型、1/2型、7型、9型和14型的荚膜多糖编码基因核酸序列，分别设计猪链球菌种和血清型特异性引物，建立并优化多重PCR检测方法，检测分析种属背景明确的73株菌株(其中猪链球菌49株、其他对照菌株24株)及临床分离样本94株（包括四川资阳临床分离样本45株）。其中73株种属背景明确菌株多重PCR种检测结果符合率为87.5%，6种主要致病血清型检出率可达10...
定量检测瘤胃纤维降解细菌的RT-PCR法
瘤胃纤维降解菌 RT-PCR 定量
2008/10/13
【目的】建立一种适用于瘤胃主要纤维降解细菌的RT-PCR定量检测方法，通过培养技术监测瘤胃纤维降解细菌在不同环境下的数量变化，为深入研究反刍动物瘤胃发酵机理以及对纤维素资源的有效利用提供技术支持。【方法】分别以Fibrobacter succinogenes、Ruminococcus flavefaciens与Ruminococcus albus 的16SrDNA为靶序列设计相应的引物，建立SYB...
用PCR检测羊毛、皮张和土壤等外环境中炭疽杆菌的研究
炭疽杆菌 PCR检测
2008/9/5
该项目检测出炭疽杆菌弱毒（pXo1-、pXo2+或pXo1+、pXo2-），优选出可快速区分炭疽杆菌强弱毒的多重PCR方法。建立了用于检测模拟污染羊毛、皮张和土壤中炭疽芽孢（sterne菌株、pasteur II菌株）的PCR方法,可特异敏感地检出0.5g羊毛中sterne菌株452个芽孢 和pasteur II菌株688个芽孢；0.5g皮张中sterne菌株452个芽孢 和pasteur II菌...