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育成品种的DNA身份鉴定是植物新品种保护、审定的关键环节，也是种业知识产权保护的有力工具。目前，水稻品种的分子鉴定主要以简单序列重复（SSR）标记为主，然而SSR标记分布不均匀，且成本相对较高，实验耗时，精准性不足。虽然近年来也开发了基于单核苷酸多态性（SNP）的基因芯片和简化基因组测序（GBS）等鉴定手段，但由于检测成本过高、分析流程复杂等缺点，在一定程度上限制了其推广应用。竞争性等位基因特异性...
五味子的DNA提取及RAPD鉴定研究
五味子 改良CTAB法 RAPD 鉴定
2011/4/6
采用CTAB、SDS、改良CTAB法对五味子总DNA提取进行研究，并对总DNA进行电泳分析和含
量测定，结果表明以改良CTAB法提取五味子叶片DNA纯度最好，以此DNA为模板可获得条带清晰、
重复性好的RAPD扩增结果。从14 条重复性好的引物中共扩增出67 条带，平均每个引物4.8 个片段，多
态性位点数为58，比例为86.6%。UPGMA聚类分析的结果与五味子形态学分类结果相似，10 份...
随机扩增多态DNA技术在天麻遗传多样性分析中的应用
天麻 RAPD分析 遗传多样性
2010/2/23
【研究目的】文章以乌天麻、黄天麻和绿天麻三种变型为研究对象，通过RAPD分析研究天麻遗传多样性，从而为天麻种源的筛选与鉴定及品种选育提供科学依据。【方法】采用改良的CTAB法提取天麻样品DNA，筛选出重复性好10条随机引物进行扩增，建立RAPD分析图谱。【结果】聚类分析表明：栽培群体乌天麻是一个高度混杂的群体，虽然个体的表现型基本相同，但从遗传物质的组成来看，基因型不一致。【结论】研究表明天麻是一...
植物DNA条形码研究现状及应用前景
植物DNA条形码 研究现状 应用前景
2010/2/21
生物DNA条形码已成为近年来生物学研究的热点，该技术在动物研究中已得到广泛应用，在植物中研究进展缓慢，植物DNA条形码筛选区域主要集中在叶绿体和核糖体内转录间隔区(ITS)，目前还未获得广泛认同的植物DNA条形码。本文主要综述了不同单片段条形码及组合条形码的研究及应用现状，并展望了植物DNA条形码应用前景。
以DNA位点纯合率评价小麦品种的一致性和稳定性
普通小麦 DNA位点纯合率 品种一致性 品种稳定性
2009/11/2
为了解小麦杂交组合高世代株系和我国小麦品种的DNA位点纯合率，及其评价小麦品种一致性和稳定性的可行性，采用172对SSR、99对EST-SSR和76对AFLP-SCAR引物，检测了10个F4代株系、10个F5代株系和511个品种的DNA位点纯合率。结果表明，F4代和F5代株系的DNA位点纯合率分别为82.1%~94.5%和95.7%~99.4%。根据F5代500个单株的DNA纯合位点比率，推测出F...
水稻干旱胁迫诱导DNA甲基化时空变化特征分析
DNA甲基化 干旱胁迫 甲基化敏感扩增多态性 高效液相层析
2009/10/12
【目的】研究水稻抗旱导入系DK106和旱敏感轮回亲本IR64苗期和分蘖期干旱胁迫前后DNA甲基化的变化情况，并比较分析叶片和根部DNA甲基化变化特征，探讨DNA甲基化在水稻干旱胁迫反应中的作用。【方法】用甲基化敏感扩增多态性技术（methylation sensitive amplified polymorphism，MSAP）和高效液相层析（high performance liquid chr...
［目的］研究野生稻DNA导入后代的耐冷性，从中筛选出耐冷性较强的导入后代，为水稻耐冷育种提供种质资源和方法。［方法］以普通野生稻的基因组DNA导入宁夏主栽品种宁粳16号、宁粳23号中所产生的后代为试验材料，以发芽期的发芽率，芽期的存活率，苗期的枯死率等作为鉴定指标，进行发芽期、芽期、苗期的耐冷性鉴定筛选。［结果］结果表明：低温胁迫下，供试水稻材料的发芽率和芽期存活率均有所降低，幼苗枯死率增加，但材...
玉米DNA 纤维的制备及端粒DNA 的Fiber-FISH
玉米 端粒DNA纤维荧光原位杂交 拷贝数
2009/6/4
[ 目的] 建立了一种快速制备DNA 纤维的方法, 用端粒DNA 在玉米纤维上进行物理定位。[ 方法] 采用刀切法从玉米嫩叶中提取
细胞核。以端粒DNA 为探针, 在玉米DNA 纤维上进行伸展DNA 纤维的荧光原位杂交( Fiber- FISH) , 研究端粒DNA 重复序列在玉米染色
体上的拷贝数。[ 结果] 用刀切法提取玉米细胞核, 提高了核的完整性, 并改善了DNA 纤维的制备效果。玉米...
DNA分子标记技术及其在玉米育种中的应用
分子标记 玉米 育种
2009/6/1
综述了近年来分子标记技术在玉米遗传图谱构建、目标基因定位、遗传多样性研究、品种真实性鉴定及分子标记辅助选择中
的应用情况。
[ 目的] 探索高粱总DNA 的快速、高效提取方法, 为将其导入水稻提供大量、高质量的DNA。[ 方法] 以高粱幼叶为材料, 分别采用
SDS 法、CTAB 法、尿素法和NaOH 法提取高粱总DNA, 并对不同方法提取DNA 的纯度、浓度和产量进行检测。[ 结果] 尿素法提取DNA 纯
度和质量最好,SDS 法和CTAB 法次之,NaOH 法最差。采用尿素法、SDS 法、CTAB 法和NaOH...
质粒拯救型T- DNA标签质粒的构建
pUC18 pWM101 T- DNA标签 重组构建
2009/5/27
[ 目的] 为了高效率地获得转基因植物的旁邻序列。[ 方法] 以pUC18 及pWM101 为出发质粒, 通过用限制性内切酶EcoR Ⅰ和
Hind Ⅲ双酶切质粒pUC18 , 得到含大肠杆菌复制起点及氨苄青霉素抗性基因的pUC18 大片断, 并将这段DNA 整合到pWM101 的T- DNA
之中构建重组质粒。[ 结果] 该质粒利用根癌农杆菌转化植物后, 可利用潮霉素筛选转化细胞, 拯救质...
以水稻黄化苗为材料，用NaOH溶液抽提DNA，对其用于基于PCR技术的DNA标记中的效果进行了分析。结果发现，用0.5 mol/L NaOH对黄化苗进行直接处理，并用等量1 mol/L Tris-HCl进行稀释、中和，离心所得的上清液即可直接用于各种PCR扩增和随后的DNA标记鉴别，包括转基因PCR片段检测、微卫星标记多态性分析(琼脂糖电泳法或毛细管电泳法)，用这种方法提取的DNA可以在短期内保存...
应用PCR技术进行种子真伪鉴别及DNA扩增仪
PCRDNA扩增仪 玉米杂交 玉米种质鉴别 种质资源
2008/9/10
该项成果以玉米杂交种及其父母本为基本研究对象，F1代杂交品种(33个)和亲本(9)个，是应用ISSR-PCR和RAPD-PCR技术对其进行鉴别的方法学研究。通过采用RAPD-PCR和ISSR-PCR两种鉴别方法，前者应用引物20、16、10、20’可明确区分33个杂交种，应用引物20、16、10、20’、3以及11也可将6个品种与其父母本区分开来；后者应用ISSR引物07、17、99、02、04、...
通过花粉管通道导入外源DNA创造抗白粉病小麦新种质
小麦 抗白粉病基因 花粉管通道转基因技术
2010/3/17
小麦品种复壮 3 0和小白冬麦的白粉病抗性表现突出 ,是 2个抗性持久、抗谱广泛的优良白粉病抗源。但由于农艺性状欠佳 ,不适于直接作为亲本用于常规育种。为此 ,采用花粉管通道法将复壮 3 0和小白冬麦的基因组DNA导入农艺性状较好的小麦品种北农 6号 ,旨在转移复壮 3 0和小白冬麦的抗白粉病基因 ,创造抗白粉病小麦新种质。本文总结 3年来所得到的研究结果 ,阐述采用花粉管通道法导入外源DNA创造...
通过花粉管通道导入外源DNA创造抗白粉病小麦新种质
小麦 抗白粉病基因 花粉管通道转基因技术
2010/2/2
小麦品种复壮 3 0和小白冬麦的白粉病抗性表现突出 ,是 2个抗性持久、抗谱广泛的优良白粉病抗源。但由于农艺性状欠佳 ,不适于直接作为亲本用于常规育种。为此 ,采用花粉管通道法将复壮 3 0和小白冬麦的基因组DNA导入农艺性状较好的小麦品种北农 6号 ,旨在转移复壮 3 0和小白冬麦的抗白粉病基因 ,创造抗白粉病小麦新种质。本文总结 3年来所得到的研究结果 ,阐述采用花粉管通道法导入外源DNA创造...