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N6-甲基脱氧腺嘌呤(6mA)是DNA腺嘌呤6号位氮原子上的甲基化修饰,在多种生命体中具有重要的生物学调控功能(图1a)。最初,6mA被发现主要存在于原核生物基因组中,用于区分自身基因组和外源DNA,保护自身DNA不被限制性内切酶性降解。近年来,6mA逐渐被发现存在于真菌、衣藻、果蝇和哺乳动物等真核生物基因组(gDNA)和线粒体DNA(mtDNA)中,其动态水平的变化调控了早期胚胎发育及线粒体转录...
柏林课题组与合作者揭示真菌质膜质子ATP酶的底物转运机制(图)
北京大学基础医学院 真菌质膜质子 真菌药物
2023/8/14
2021年11月8日,北京大学基础医学院柏林课题组在Nature Communications杂志在线发表了题为Structure and activation mechanism of the hexameric plasma membrane H+-ATPase的研究论文(https://doi.org/10.1038/s41467-021-26782-y)。该研究解析了自抑制(3.2 )和激...
日本科学家发现可防治幽门螺杆菌导致的胃癌的一种酶
日本科学家 幽门螺杆菌 胃癌 酶
2016/3/23
日本研究人员2016年3月15日在英国《自然·微生物学》杂志网络版上报告说,他们发现了一种酶,有助防治幽门螺杆菌导致的胃癌。胃癌是人类第二大癌症杀手,尤其在东亚地区多发,日本每年约5万人死于胃癌。大部分胃癌由幽门螺杆菌感染导致。日本东京大学的研究人员发现,幽门螺杆菌的cagA蛋白质侵入胃细胞后,会和一种名为SHP2的酶结合,引发胃癌。他们发现SHP2还有一种“兄弟”酶SHP1,cagA蛋白质如果和...
中国科学院上海生命科学研究院揭示人类致病菌白色念珠菌亮氨酰-tRNA合成酶的C-末端结构域识别tRNASer(CAG)和tRNALeu的机理(图)
中国科学院上海生命科学研究院 人类致病菌白色念珠菌 亮氨酰-tRNA合成酶 C-末端结构 tRNASer(CAG) tRNALeu
2015/12/25
2015年12月16日,国际学术期刊Journal of Biological Chemistry 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所王恩多研究组的最新研究成果:C-terminal domain of leucyl-tRNA synthetase from pathogenic Candida albicans recognizes both tRNASe...
脂质体介导人端粒酶逆转录酶基因构建永生化软骨细胞方法的建立及评价
人端粒酶逆转录酶 转染 软骨细胞 细胞增殖
2012/5/18
探索将人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转入兔软骨细胞以获取大量种子细胞的方法和技术。方法:分离培养原代兔软骨细胞,以pcDNA3.1/Zeo(+)-hTERT载体进行基因转染,对照组则为空载体pcDNA3.1/Zeo(+),筛选并挑选出阳性克隆后扩增,以逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测转染hTERT基因后的软骨细胞hTERT mRNA表达;甲苯胺蓝染色判断转染hTERT基因...
副溶血弧菌TaqMan双重实时-聚合酶链反应检测方法的建立
副溶血弧菌 聚合酶链反应 评价研究
2009/11/12
目的建立副溶血弧菌TaqMan实时-PCR和毒力基因TaqMan双重实时-PCR筛检的实验室检测方法。方法根据副溶血弧菌toxR基因的保守序列设计引物和TaqMan探针,建立检测副溶血弧菌的实时-PCR方法;根据副溶血弧菌耐热直接溶血素(thermostable direct hemolysin, tdh)和耐热相关溶血素(thermostable related he...
布鲁氏菌多重聚合酶链反应鉴定研究
布鲁氏菌 多重聚合酶链反应 鉴定
2009/11/11
目的 在同一体系中对布鲁氏菌6个种进行鉴定。方法 根据布鲁氏菌6个种的差异基因设计5对引物,应用多重聚合酶链反应(PCR)方法对布鲁氏菌进行鉴定。先用标准菌株建立方法,优化实验条件,然后扩增地方株进行验证。结果 除绵羊附睾种外多重引物PCR方法能将其余5个布鲁氏菌种全部鉴定出来。结论 这种方法快速准确,且对实验操作人员安全,是布鲁氏菌鉴定的辅助方法。
军团菌16SrRNA聚合酶链反应方法的建立
16SrRNA 基因 军团菌 聚合酶链反应
2009/11/10
本文建立了一个用于检测军团菌的多聚酶链反应方法。扩增参考菌株的染色体DNA(L.pneumophital-14、L.micdadei、L.dumoffii Llongbeachae、L.Jordanis、L.bozemanii),均可检出375bp的16SrRNA基因片段。对于已经监定的5株国内分离菌株染色体DNA进行扩增,获得了相同的结果,地高辛标记16SrRNA基因探针与扩增产物杂交,结果为阳...
应用TaqMan实时荧光-聚合酶链反应方法快速检测粪便标本空肠弯曲菌的研究
空肠弯曲菌 实时荧光PCR 检测
2009/11/10
目的建立空肠弯曲菌TaqMan实时荧光-PCR方法,用于粪便标本的直接检测。方法根据空肠弯曲菌特异性基因hipO和mapA分别设计引物和探针,在对2组引物和探针进行灵敏度、特异性和重复性评价的基础上,对45例临床腹泻患者粪便标本提取DNA之后,荧光PCR检测,同时进行分离培养。 结果两组引物和探针能准确检测空肠弯曲菌菌株2株,检测限可达到10~20 cfu/ml,并与其他肠道致病菌无交叉反应。检测...
目的: 观察10-23脱氧核酶对细菌β-内酰胺酶基因表达的抑制作用。 方法: 设计并合成针对细菌β-内酰胺酶SHV-5基因的10-23脱氧核酶、反义寡核苷酸和无关对照寡核苷酸,采用电穿孔法将其分别导入表达β-内酰胺酶SHV-5的大肠杆菌中,观察耐药菌在导入脱氧核酶后,在含β-内酰胺类抗菌素培养基中的生长活力及β-内酰胺酶表达量的变化。 结果: 10-23脱氧核酶导入表达blaSHV-5的大肠杆菌后...
目的:构建pCool-GST-ICAD/CAD的表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达具有生物学活性的CAD核酸酶。方法:用PCR扩增CAD核酸酶基因,将扩增产物克隆入pCool-GST-ICAD载体中构建出pCool-GST-ICAD/CAD表达质粒。经酶切和电泳鉴定正确后,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达产物经亲和层析、离子交换层析及凝胶过滤等方法分离纯化,最后用SDS-P...
血清胃蛋白酶原含量作为幽门螺杆菌除菌疗效判定指标的研究
血清胃蛋白酶原含量 幽门螺杆菌 除菌疗效
2009/7/28
目的: 探讨血清胃蛋白酶原含量作为幽门螺杆菌根除疗效判定指标的应用价值.方法: 对359例幽门螺杆菌相关性胃疾病患者采取常规三联疗法进行除菌治疗,利用免疫量度放射分析法(IRMA)分别在治疗前和治疗后1、5、18 mo时测定其血清胃蛋白酶原含量,同时利用胃黏膜HE染色、H pylori抗体 ELISA检测及H pylori-DNA PCR检测三种方法联合判定H pylori除菌治疗效果.结果: ...
鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合酶基因在生物被膜内的表达及耐药分析
鲍曼不动杆菌 Ⅰ类整合酶基因 生物被膜 RT-PCR
2009/4/17
鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合酶基因在生物被膜内的表达及耐药分析。
肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药性分析
耐药性 超广谱β-内酰胺酶 克雷伯菌 肺炎
2008/9/16
目的 了解临床分离的肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及对13种抗生素的耐药性。方法 收集2005~2007年分离出的216株肺炎克 雷伯菌,采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行药敏试验,用纸片扩散确证实验检测超广谱β-内酰胺酶。 结果 共检出产ESBLs菌68株,检出率为31.5%。产ESBLs菌 对头孢类抗生素高度耐药,对亚胺培南高度敏感(100%),对头孢西丁,头孢哌酮...