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研究微小RNA-422a(miR-422a)靶向调控人性别决定区Y框6(SOX6)对过氧化氢(H2O2)刺激下大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12(具有神经细胞特性)损伤的作用。方法:采用real-time PCR检测H2O2处理后PC12细胞中miR-422a表达的变化,在PC12细胞中转染miR-422a mimics,MTT法测定细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,流式细胞术测定细...
探讨黄芪总苷(astragalosides)对过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠心肌细胞H9c2自噬和凋亡作用的影响及作用机制。方法:建立大鼠心肌细胞H2O2氧化应激损伤模型,并用20 mg/L的黄芪总苷和0.1 mg/L的雷帕霉素分别处理对应组细胞。采用流式细胞技术检测细胞凋亡率;采用吖啶橙染色观察细胞自噬情况;采用Western blot检测p-mTOR蛋白、P70S6K蛋白、自噬蛋白(LC3)和...
哈巴苷对H2O2诱导的大鼠心肌细胞H9c2氧化应激损伤的保护作用
细胞凋亡 心肌损伤 哈巴苷 氧化应激
2020/7/21
探究哈巴苷(HG)对大鼠心肌细胞氧化应激损伤的作用。方法将H9c2细胞随机分为对照组(H9c2组)、哈巴苷组、H2O2组和H2O2 + 哈巴苷组,用H2O2处理细胞,复制氧化损伤模型。用哈巴苷(4 μmoL)处理细胞,CCK8 检测细胞增殖,Hoechst染色检测细胞凋亡,二氯荧光乙酰乙酸盐(DCF)法检测细胞内活性氧 (ROS),根据试剂盒说明书检测上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛( M...
肺癌是世界范围内常见的恶性肿瘤,Ca2+对于肿瘤细胞凋亡有重要的调控作用。实时监测肺癌细胞内Ca2+水平,有助于深入研究Ca2+介导肺癌细胞凋亡的分子机制。本研究旨在观察Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4在H2O2诱导的A549细胞凋亡过程中的应用,实时测定胞浆Ca2+浓度([Ca2+]i),探讨[Ca2+]i与细胞凋亡的关系,并比较两种Ca2+探针在荧光强度及[Ca2+]i测定值方面的差...
泰山白花丹参提取物对H2O2诱导的人脐血内皮祖细胞损伤的保护作用及机制
脐血内皮祖细 过氧化氢 损伤 保护作用
2012/8/2
研究泰山白花丹参提取物对过氧化氢(H2O2)诱导的人脐血内皮祖细胞(EPCs)氧化应激损伤的保护作用及机制。 方法 :通过密度梯度离心分离人脐血单个核细胞,EBM-2完全培养基诱导分化培养EPCs。以0.001%H2O2诱导EPCs损伤,以泰山白花丹参提取物干预,以eNOS抑制剂L-NMMA定位泰山白花丹参对EPCs的作用靶位。通过光镜观察细胞形态,以四甲基偶氮噻唑蓝比色法检测细胞活力,用流式细胞...
没药甾酮对H2O2损伤PC12细胞的保护作用
没药甾酮 PC12细胞 氧化应激 过氧化氢
2009/12/4
探讨没药甾酮(guggulsterone)对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用。以过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)损伤PC12细胞为氧化应激损伤模型, 维生素E为对照, 采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide,MTT]法检测细胞增殖状况; 试剂盒检测乳酸脱氢酶(lact...
背景与目的:利用H2O2作用于Ⅱ型人肺泡上皮细胞A549,分析8-羟基脱氧鸟苷(8-oxo-dG)的形成,探讨修复基因hMTH1与hOGG1在DNA氧化性损伤中的作用。 材料与方法: 在A549细胞培养液中分别加入终浓度为0、50、100、200和300 μmol/L的H2O2孵育不同时间(0、6、12、18和24 h)后,利用高压液相色谱串联电化学检测技术、核酸内切酶切割法及RT-PCR技术分析...
非促分裂型haFGF对H2O2损伤心肌细胞的保护作用研究
成纤维细胞生长因子 过氧化氢 心肌
2009/10/27
目的:了解活性氧自由基对心肌细胞的损伤状况,并在此基础上探讨非促分裂型haFGF(nm-haFGF)对心肌细胞的保护作用。方法: 采用胰蛋白酶消化法,体外分离和培养新生SD乳鼠心肌细胞,建立H2O2损伤心肌细胞的模型,检测细胞存活率、细胞凋亡和观察细胞形态学的变化,以评价H2O2对心肌细胞的损伤状况,并加入一定浓度的nm-haFGF,观察心肌细胞的存活率、SOD活性和MDA含量的改变,以及凋亡的...
目的:观察H2O2在常氧时对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的Kv的影响, 探讨H2O2对肺动脉平滑肌细胞的Kv通道的作用。 方法:用酶解法急性分离单个PASMCs,以全细胞膜片钳技术记录PASMCs膜上的电压依赖性钾通道 (voltage-gated potassium channel, Kv) 电流。 结果:常氧下 H2O2可显著增加Kv电流,电流-电压关系曲线左上移;而且Kv电流呈浓度依...
目的:探讨西红花酸对过氧化氢(H2O2)诱导的培养心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的作用。 方法: 通过光镜观察细胞形态、碘化丙啶(PI)染色法和流式细胞术相结合检测培养细胞凋亡率、免疫荧光染色法和流式细胞术相结合检测细胞中caspase-3、Bcl-2蛋白。 结果: 在本实验使用浓度范围内,各浓度H2O2组细胞形态明显改变、凋亡率明显高于正常对照组,1×10-4 ...
目的:探讨ERK1/2-STAT3通路在H2O2预处理导致的适应性细胞保护中的作用。方法:在PC12细胞建立H2O2预处理对抗氧化应激(300 μmol/L H2O2)损伤细胞的模型。应用Hoechst33258核染色法观察细胞调亡的形态学改变;应用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫印记法(Western blotting) 测定p-ERK1/2和p-STAT3的表达水平。结果:1...
目的:观察氯通道阻断剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)-苯甲酸(NPPB)、尼弗灭酸(NFA)对H2O2诱导的神经胶质瘤C6细胞损伤的影响。方法:MTT法检测NPPB、NFA、H2O2作用的C6细胞生存率;紫外分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率以及谷胱甘肽GSH水平;RT-PCR检测谷氨酸半胱氨酸合成酶(GCL)亚单位GCLC、GCLM及线粒体氯通道(CLIC4) mRNA表达;Western ...
目的:探讨核因子-кB(nuclear factor-кB, NF-кB)在H2O2预处理诱导的适应性细胞保护作用中的作用及JAK-STAT通路对NF-кB的调制。方法:在PC12细胞建立H2O2预处理对抗氧化应激(300 μmol/L H2O2)损伤细胞的实验模型。应用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blotting)测定NF-κB和STAT3的表达水平...
VEGF诱导血管内皮细胞产生H2O2及其促增殖作用
过氧化氢 血管内皮细胞 血管内皮细胞生长因子 过氧化氢酶
2009/6/4
目的: 研究VEGF诱导血管内皮细胞产生细胞外H2O2及其在VEGF促血管内皮细胞增殖功能中的作用。方法: ① 以H2DCFDA为H2O2指示剂,检测 500 μg/L VEGF刺激下,血管内皮细胞H2O2的产生;② 以MTT法检测3×106 U/L过氧化氢酶(CAT),及外源性加入5-20 mmol/L H2O2对VEGF促增殖功能的影响。结果: ① 在VEGF刺激血管内皮细胞 15 min 后...