搜索结果: 1-15 共查到“医学 cDNA”相关记录132条 . 查询时间(0.113 秒)
克隆得到雷公藤一型4α-甲基氧化酶（TwSMO1）（GenBank KX987126）全长基因，并对其进行序列分析及初步的功能验证。方法：根据雷公藤转录组数据，利用cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆得到雷公藤4α-甲基氧化酶基因（TwSMO1），并利用相关软件对所得核酸序列及其所编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。用茉莉酸甲酯（MeJA）诱导雷公藤悬浮细胞，用实时荧光定量（RT-PCR）的方...
森林革蜱半饱血雄蜱抑制消减杂交cDNA文库的构建及差异基因的分析
抑制消减杂交 cDNA文库 差异基因
2014/9/25
构建森林革蜱（Dermacentor silvarum）半饱血雄蜱抑制消减杂交cDNA文库，分析差异基因。 方法 以森林革蜱半饱血雄蜱为实验组（tester），未吸血雄蜱为对照组（driver），分别提取总RNA，SMARTER PCR合成双链cDNA，Rsa Ⅰ酶切后连接接头并进行抑制消减杂交。巢式PCR扩增杂交产物，经柱纯化后连接至PMD?鄄18T中，转化大肠埃希菌DH5α感受态细胞，进行蓝白...
金黄色葡萄球菌N315 T7噬菌体cDNA展示文库的构建
噬菌体展示 cDNA文库 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 N315
2014/7/30
构建MRSA N315菌株的T7噬菌体cDNA展示文库，以筛选和鉴定影响N315 ccr基因表达的调节因子。 方法 采用Tripure试剂提取N315总RNA，逆转录合成双链cDNA，经末端修平、接头连接、酶切后柱洗脱等处理后，连接T7Select 10-3载体，体外包装扩增获得N315 T7噬菌体cDNA展示文库；通过双层平板实验鉴定所建原始文库及扩增文库的库容；PCR鉴...
人前蛋白转化酶枯草溶菌素9的cDNA克隆和表达及多克隆抗体的制备
人前蛋白 酶枯草溶菌素9 cDNA克隆 多克隆抗体
2013/9/16
构建人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9)的原核表达载体并诱导其表达, 制备其蛋白的多克隆抗体。方法 聚合酶链式反应扩增人工合成的pcsk9 cDNA序列; 扩增产物经TA克隆、双酶切、连接, 构建pET-28b-pcsk9表达载体; 将重组质粒转化入大肠杆菌表达菌BL21（DE3）的感受态细胞中, 诱导表达; 用纯化检测过的目的蛋白免疫新西兰兔, 最后采集全血收集血清, 获得多克隆抗体, 并对...
关中黑猪IL-5 cDNA的克隆表达与多克隆抗体制备
关中黑猪IL-5 cDNA 克隆表达 多克隆 抗体制备
2013/9/16
克隆关中黑猪IL-5 cDNA, 构建该基因的不同表达质粒, 获得表达的IL-5并制备其多克隆抗体。方法 提取佛波酯（PHA）刺激的关中黑猪外周血单个核细胞（PBMC）总RNA, RT-PCR克隆猪IL-5基因（sIL-5）, 鉴定后将sIL-5基因分别克隆到pQE30、pET-32a和pEGFP-N1中, 构建重组表达质粒pQE-sIL-5和pET-sIL-5及pEGFP-sIL-5, 将pEG...
为揭示猪Opn4基因的结构并研究其在猪视网膜中昼夜表达差异与生长各阶段表达规律, 文章克隆了猪Opn4基因全长CDS区序列, 定量检测了Opn4基因在猪视网膜中昼夜的表达量以及其在不同生长阶段的表达量。结果表明, Opn4基因编码区序列为1 437 bp, 编码478个氨基酸, 分子式为C2398H3705N623O651S23; Opn4基因在白昼的表达量极显著高于夜晚(P<0.01); Opn...
田鼠巴贝虫cDNA文库构建与免疫筛选
田鼠巴贝虫 cDNA文库 免疫筛选
2013/11/21
目的 构建田鼠巴贝虫cDNA文库，从中筛选免疫诊断候选抗原。 方法 用田鼠巴贝虫感染BALB/c小鼠，约7 d后待虫血密度达到70%时取血，提取虫体总RNA，经mRNA 纯化试剂盒纯化后，构建田鼠巴贝虫的cDNA文库。用田鼠巴贝虫感染阳性小鼠血清筛选cDNA文库，获得阳性克隆，PCR鉴定阳性克隆插入片段大小，测序并进行同源性分析。 结果 所构建的田鼠巴贝虫cDNA文库的滴度为5.2 × 105噬菌...
细粒棘球蚴cDNA文库的构建和免疫筛选
细粒棘球蚴 原头节 cDNA文库 免疫筛选
2013/11/25
目的构建细粒棘球蚴原头节的λ ZAP Ⅱ cDNA文库，并对构建的文库进行免疫筛选。 方法采集感染细粒棘球蚴的绵羊育囊中的原头节，用Trizol试剂抽提总RNA，用mRNA纯化试剂盒纯化mRNA作为模板合成cDNA，并对其进行末端平端化、EcoR Ⅰ接头连接和磷酸化及Xho Ⅰ酶切，然后应用Sepharose CL2B分离柱对其进行分级分离，收集大于500 bp的cDNA片段，使用Gigapac...
在已知中国美利奴羊MHC(Major histocompatibility complex)区段BAC(Bacterial artificial chromosome)克隆序列信息和预测的基因注释前提下, 用位于中国美利奴羊基因组BAC文库MHC区段的6个BAC克隆酶切片段为探针, 以噬菌斑原位杂交筛选法筛选中国美利奴羊混合组织cDNA文库(库库杂交), 对分离到的cDNA阳性克隆进行全序列测定,...
克隆高良姜1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸还原异构酶(DXR)的全长cDNA,分析其组织表达模式及茉莉酸甲酯(MeJA)的调控模式,为高良姜有效成分的基因调控及基因工程育种奠定基础。 方法: 应用简并引物RT-PCR和RACE技术从高良姜根茎中克隆DXR全长cDNA,运用生物信息学解析其编码的蛋白质结构,实时荧光定量PCR法分析其组织表达模式和MeJA的调控模式。 结果: 克隆了高良姜DXR全长cDN...
构建正常人支气管上皮细胞(16HBE)与氯化镉诱导转化16HBE细胞间差异表达基因的消减cDNA文库。方法 以16HBE为驱动子,氯化镉诱导转化16HBE细胞为检测子,应用抑制性消减杂交(SSH)方法构建cDNA文库,经2次消减杂交和2次PCR后,将巢式PCR产物插入载体,随机挑选克隆进行鉴定。结果 得到纯度高及完整性好的总RNA和mRNA,并扩增出良好的双链cDNA,cDNA与接头的连接效率＞2...
寻找可用于日本血吸虫病诊断或疗效考核的抗原分子。 方法 在安徽省安庆市某现场，采集经粪检（Kato-Katz法，2送6检）日本血吸虫卵阳性的10份患者血样，患者年龄13～64岁，EPG为4～172；并收集该10例患者经吡喹酮（60 mg/kg×2 d）治疗6个月后的血样，将吡喹酮治疗前和治疗后的血清各10份分别混合，分别筛选虫卵cDNA文库，将所获阳性克隆分类，测定阳性克隆插入片段的DNA序列，经...
铁皮石斛均一化全长cDNA文库的构建与序列分析
铁皮石斛 均一化 cDNA文库 序列分析
2013/3/12
为了获得药用植物铁皮石斛功能基因的信息和筛选功能基因。方法: 以SMART(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)方式合成全长cDNA,结合DSN(duplex-specific nuclease)均一化技术,构建铁皮石斛茎组织的均一化全长cDNA文库。结果: 该文库重组率为93.9%,文库滴度1.3×106 cfu·mL-1,插入片段平均...
目的筛选和鉴定广州管圆线虫未知基因序列，丰富该虫的基因序列数据，为寻找诊断或药物靶点分子提供实验依据。方法构建广州管圆线虫IV期幼虫cDNA噬菌体文库，随机挑选单个噬菌斑，提取噬菌体DNA进行PCR，扩增其插入的cDNA片段并对PCR产物进行序列测定；采用生物信息学方法对表达序列标签（expressed sequence tags，EST）序列进行分析。结果获得了51条广州管圆线虫基因的EST序列...