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M蛋白基因shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究
PRRSV RNA 干扰 M 蛋白基因
2008/10/27
【目的】通过靶向PRRSV基因组中的M基因的siRNA来抑制PRRSV在Marc145细胞中的复制。【方法】构建4个能转录小发夹RNA（shRNA）的质粒，将其与靶蛋白表达质粒共转染HEK293A细胞，观察荧光或进行半定量PCR；或将其转染Marc145细胞，感染PRRSV后进行IFA、TCID50和实时PCR检测。【结果】shRNA表达质粒对M融合蛋白表达的抑制率约为50％，使M真核质粒表达蛋白...
【目的】提高猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）基因免疫的效果，构建含CpG基序和PRRSV ORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5。【方法】经酶切鉴定和序列测定，将重组质粒转染COS-7细胞，经间接免疫荧光试验证实CpG-pVAX1-ORF5可表达PRRSV GP5蛋白。免疫SPF小鼠，检测鼠的特异性抗体滴度、脾T淋巴细胞亚群数量（CD4+和CD8+）以及淋巴细胞增殖反应（MTT...