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两栖动物皮肤是其接触外界的第一道防线,其皮肤中含有大量的防御性功能物质。抵抗微生物感染是两栖动物皮肤的最重要功能之一。
研究发现蛀木水虱体内含有可分解木头的酶
蛀木水虱 酶
2010/3/12
猪胰蛋白酶自溶产物中δ-、γ-和σ-胰蛋白酶的分离与结晶
猪胰蛋白酶 自溶作用 δ- γ-和σ-胰蛋白酶
2008/1/5
摘要 将1%猪胰蛋白酶溶于0.05M,pH9.0硼酸缓冲液中,在25℃自溶6小时后,上大豆胰蛋白酶抑制剂亲和层析柱STI-Sepharose4B,用pH5.0—3.0的磷酸钾缓冲液梯度洗脱,可以有效地分开各种自溶活性产物。从得到的三个活性峰S_1、S_2和S_3中,用DNS-Cl Edman法和有色Edman法测定酶分子肽键断裂后N末端的部分氨基酸顺序,从而鉴定出三种不同形式的自溶活性产物:δ~-...
摘要 本文介绍了珠状交联琼脂糖及以此作为载体,经氯代环氧丙烷活化后与蛋白酶(胰蛋白酶或糜蛋白酶)结合,制成固定化蛋白酶亲和吸附剂,进而用以亲和层析牛肺提取液中的Kunitz抑制剂的方法。纯化出的抑制剂在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现单一条带,与参照物Trasytol(商品Kunitz抑制剂)具有相对应的电泳迁移率,其分子量也相符。纯化产品每毫克蛋白的抑制活力相当于16 000胰蛋白酶BAEE单位...
大鼠、小鼠胰蛋白酶的分离纯化及动力学性质
大鼠 小鼠 胰蛋白酶 动力学常数
2007/12/20
摘要 采用STI-Sepharose 4B亲和层析的方法,从鼠新鲜胰脏中分离得到纯的胰蛋白酶。大鼠胰蛋白酶的比活为24 615BAEEU/mg蛋白,总活性回收率47%,小鼠胰蛋白酶的比活为32 768BAEEU/mg蛋白,总活性回收率55%。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,大鼠、小鼠胰蛋白酶均呈现单一蛋白带,两者的分子量都是24kD。用等电聚焦电泳测定,二者的等电点均为p19.5以上。对它们的动...
摘要 通过硫酸铵沉淀、DE_(52)层析、超滤和高压羟基磷灰石层析,从大鼠肌肉条件培养液中得到电泳纯的神经白介素(NLK)。未发现NLK的神经营养活性(维持鸡胚背根神经元存活和促进脊髓神经元突起伸展)及免疫活性(促进外周血单个核细胞产生免疫球蛋白),却有较强的6-磷酸葡萄糖异位酶(GPI)活性。SDS-PAGE测得亚基分子量为56kD;IEF示五条细而相距很近的带,PⅠ值分别为8.20,8.15,...
五步蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA的克隆和序列分析
五步蛇 金属蛋白酶 克隆 序列分析
2007/12/18
摘要 抽提五步蛇毒腺总 RNA,通过反转录 PCR( RT- PCR)扩增出五步蛇毒腺中一种低分子量金属蛋白酶 ( aculysinl)的 c DNA,克隆到 p GMT- vector并测定了全序列 .推导其编码的蛋白质序列 ,发现 aculysinl是以酶原形式合成的分泌蛋白 ,酶原包括信号肽、前肽、金属蛋白酶成熟肽和间隔肽4个部分 .金属蛋白酶成熟肽与其它蛇毒金属蛋白酶相比 ,蛋白质一级结构...
大鼠骨骼肌多催化功能蛋白酶的提取、鉴定及其抗血清的制备
多催化功能蛋白酶 提纯 抗血清
2007/12/18
摘要 为了研究多催化功能蛋白酶(multicatalyticalproteinase,MCP)在负氮平衡形成中的作用,以大鼠骨骼肌为原料,提取此酶并制备其抗血清.将大鼠骨骼肌粗提物经45%~65%饱和度硫酸铵分级盐析、阴离子交换层析和凝胶过滤,最后从Sepharose4B层析柱上获得单一活性洗脱峰.酶活性用Carbobenzoxy-Val-Gly-Arg-4-nitrinilideacetate作...
摘要 提纯人血浆运铁蛋白(Tf),经链霉蛋白酶水解,再经肼解法制备Tf中的二天线N糖链,后者经还原末端的氨基吡啶(PA)化进行荧光标记,再切除外链的唾液酸和半乳糖残基,获得Gn_2Man_3Gn_2-PA荧光标记糖链,以此制备的糖链为受体底物,UDP-GlcNAc为供体底物,用反相HPLC分离底物和产物,建立了N乙耽氨基葡萄糖转移酶V(GnT-V)的测定法。用GnT-V作为肿瘤生化标志物,观察到在...
猪骨胶原蛋白酶解物中血管紧张素转换酶抑制剂的提纯
胶原蛋白 血管紧张素转换酶 抑制剂 提纯
2007/12/17
摘要 将猪骨胶原蛋白粗提物用胰蛋白酶水解,经阳离子交换树脂层析,SephadexG-25柱凝胶过滤,以及数次反相高效液相层析,最终获得一具有抑制血管紧张素转换酶(ACE)活性的单一峰值的多肽。其氨基酸组成为Ile,His,Ser,Gly,Ala,Pro,Tyr,Leu,Asp.以Hip-Gly-Gly为底物,在pH为7.1的条件下,此肽对猪肺ACE的I_(50)值为26μmol/L。
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